细胞室是进行各种细胞培养的净化级实验室,所有进入实验室的人员都必须遵守实验室有关的规章制度。
第一章 总则
第一条 细胞室主要由团队内相关科研人员使用,原则上不对外开放,其他人员如确实需使用细胞室必须预先征得实验室负责人和细胞室负责人同意。
第二条 新养细胞的同学,需先跟随由负责人指定的人员学习,熟记细胞室管理条例,最后通过细胞操作考核后,方可进入细胞室进行实验。严禁未经许可擅自进入细胞室或使用相关设备。
第三条 细胞室正常使用过程中,进出实验室的器械和样品需通过传递窗,严禁随身带入。实验用品应尽量一次带入,严禁将与实验无关的物品带入实验室,在细胞室内不得进行微生物等其它易污染物的培养,禁止从事任何高危生化实验。
第二章 条例
第一条 常规操作 实验人员必须在细胞室缓冲间内更换细胞室专用隔离服、拖鞋、并戴上口罩,严禁不穿隔离服进入细胞室、尽量避免在缓冲间走动、停留。细胞室最多可4个人同时使用。实验过程中严禁喧哗,闲聊,反复进出培养室。离开细胞室时应在缓冲室填写使用登记。
第二条 培养箱使用规则
1.从培养箱取放物品前,用酒精清洁双手和手套,尽量缩短开门时间和减少开门次数。(注:培养箱中的空气是经过过滤的洁净空气。长时间敞开或频繁开关培养箱,容易造成污染。)
2.从培养箱拿取细胞时轻拿轻放,动作迅速,随手关紧培养箱门。未经允许,禁止翻看、移动他人细胞或样品,如有特殊需要的,请联系实验室负责人协调。
3.培养瓶/皿放入培养箱前,用酒精消毒表面,并稍等至酒精挥发后再放入,以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。
4.普通培养中的细胞,若非实验特殊需要,每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次,2人以上共用的细胞,可约好时间一起观察。(注:频繁将细胞拿出观察,容易给培养箱造成污染,同时也会影响细胞生长条件的恒定。)
第三条 显微镜使用规则
1.倒置相差显微镜使用前,用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。
2.短时间内需再次使用显微镜时,为避免频繁开关显微镜电源,可不必关闭显微镜电源,但须将亮度旋钮调到最低;较长时间不需使用或离开细胞室时,须按规定关闭显微镜电源。 第四条 超净台相关操作规则
1.超净台使用遵循预约原则。提前预约,细胞室内填写使用登记。预约内容请包括:预约时间、姓名、使用日期、使用时间段、实验内容 。
2.使用前、后需用酒精棉球擦拭工作区消毒,所有物品放入超净台内使用前均应消毒,超净台内严禁堆放物品影响风路平衡,不同超净台内物品严禁频繁交换使用。
3.点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够,液面应占瓶高1/3-2/3。(注:消毒用75%的酒精,酒精灯用95%以上的酒精,使用前请留意)
4.超净台中应摆放废液缸,用于暂时存放废弃物,实验结束后将废液缸带走。( 注:液缸应及时处理,严禁长时间放置,以免留有大量培养液滋生细菌。)
5. 细胞实验后任何含有细胞培养污物的培养瓶,离心管,移液管等必须及时带出细胞室。
第五条 器具的清洗规则
1.可回收的移液管、离心管、培养瓶皿等,放入装有碱液的塑料桶中浸泡,桶内需有足量的水以没过浸泡物品。(注:保证浸泡的瓶、管内完全被清水充满。)
2.器具经碱液侵泡过夜,冲洗干净并烘干后,放入酸缸浸泡过夜,冲洗干净并烘干。洗涤程序:清水冲10次,然后再用纯水冲5次,倒置于烘箱中晾干。并及时包装灭菌。
第六条 冰箱、试剂等相关操作规则
1.从冰箱取放物品动作要迅速,关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。严禁长时间敞开冰箱门。
2.各人存放于冰箱内的培养液、生化试剂、样品要注明姓名、配制日期、样品名称,特殊试剂需获得细胞室管理人员同意后方能放置。不得使用他人的培养液或其他生化试剂。
3.分装好的血清长时间保存于-20℃,使用前放于4 ℃预解冻。原则上解冻好的血清应全部配成含血清的培养基备用,若有剩余,则暂存于4℃并尽快使用。尽量不要使用他人开过的血清,以免交叉污染。
4. 细胞室的冰箱空间有限,尽量仅放置使用频率较高的试剂。请勿将一些闲置试剂,污染试剂长期放置在此冰箱。
5.负责人会定期对冰箱进行清理,发现无标记,过期试剂等违规物品将全部清除出去,并且查找试剂配置人给予警告。
第七条 进入细胞室物品控制
1.所有进入细胞室的物品需经过传递窗,尽量经过紫外照射,酒精表面消毒。
2.严禁将可能含有污染物或病原菌的实验物品带入细胞室。
第八条 细胞室清洁守则
1. 值日时间:每周周一开始,至周日结束。
2.日常工作:准备75%和95%乙醇及棉球供细胞室使用,倒废液,维持细胞室的清洁与整洁,主持细胞室塑料耗材的灭菌工作,购买、分装双抗,检查培水浴锅、养箱内水量是否足够。
3.每两周大清洁:用新洁尔灭打扫细胞室。 清洁顺序:0.1%新洁尔灭擦拭超净台,桌面,传递窗,超净台在用新洁尔灭擦拭后还需用75%乙醇擦一遍;用0.1%新洁尔灭拖地,紫外线消毒细胞室30分钟或过夜。(注:值日期间,值日生需给水浴锅、培养箱水槽换水一次,给细胞室内的隔离服灭菌一次。)
4. 在没有出现问题的情况下,每2个月清洁一次培养箱(由细胞室负责人主持)。
第九条 制度的实施与处罚
1.细胞室负责人密切关注细胞室的使用情况,发现违反规章操作者首先给予提醒,并做记录。
2.对于一周内违反3次以内者予以警告,3-5次者罚做细胞室清洁1周,超过5次者停止其对细胞室使用权限,需重新参加培训后才能再次使用。
第三章 附则
本规章制度从公布之日起开始执行。本实验室追求不断地进步,各位老师及使用人员若有良好的建议可与细胞室负责人沟通,我们会及时协调,旨在为团队提供和谐,高效的实验条件。