广西肿瘤免疫与微环境调控重点实验室细胞房使用规定

一、 培养箱使用规则

1. 从培养箱取放物品前，用酒精清洁双手，尽量缩短开门时间和减少开门次数。

2. 培养瓶皿放入培养箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精挥发后再放入，以免培养箱内滞留过多乙醇蒸气。

3. 普通培养中的细胞，若非实验需要，每瓶/板细胞每天只需要观察生长状态一次，2人以上共用的细胞，可约好时间一起观察。

注：频繁将细胞拿出观察，容易给培养箱造成污染，同时也会影响细胞生长条件的恒定。

二、 显微镜使用规则

1. 显微镜使用前，用酒精棉从中间至周围擦拭载物台。

2. 关闭显微镜时，先将光源调至最小，然后再关闭电源。

3. 离开细胞房时或较长时间不需使用时，及时关上电源，延长灯泡寿命。尽量避免频繁开关显微镜电源。

三、 超净台相关操作规则

1. 使用前需用酒精棉球擦拭工作区消毒，所有物品放入超净台内使用前均应消毒，使用后需用酒精棉球擦拭整个超净台。

2. 点燃酒精灯前需检查瓶中酒精是否足够，液面应占瓶高1/3-2/3。

注： 消毒用75%的酒精，酒精灯用95%的酒精.

注： 酒精和酒精棉球由值日生负责补给，发现细胞房内存放量不足时请及时通知值日生。

3. 超净台中应摆放废液杯一只，用于暂时存放废弃物，实验结束后将杯内垃圾袋倒入垃圾桶中。若发现垃圾袋破损，则应及时用84消毒液清洗废液杯并晾干。

四、培养液、试剂等相关操作规则

1. 从冰箱取放物品动作要迅速，关门时要检查门是否关好。按类别存放试剂。

2. 培养液2人共用一瓶，要注意避免污染。

3.  胰酶水浴时间不宜太长，10min即可。

五、值日生工作职责

1. 每周值日生时间从周一开始，周日结束。

2. 值日周开始时需做的事情：在周一或之前准备好灭菌的枪头、离心管、干烤好的玻璃器皿，供未来一周的使用。配制消毒用的75%的酒精，制作酒精棉球，给细胞房内添加足够的95%乙醇供酒精灯使用。

3. 值日周内每天需做的事情：8点之前开紫外灯消毒细胞房1h，消毒前、后要及时在群里通知，以免耽误他人实验；检查培养箱内水量是否足够；检查灭菌物品的储备情况，以便及时补充；检查培养液、PBS、酒精等公用试剂的储备情况。

4. 值日周结束前需完成的事情：星期日下午打扫细胞房。包括拖地，擦桌子、清洁和整理抽屉，擦超净台、冰箱及桌上的仪器，给水浴锅加水或换水（蒸馏水），用84消毒液清洗细胞房专用的拖鞋，紫外灯消毒细胞房。切记给培养箱换DD水，保证水质清洁！